一、常用的多聚赖氨酸包被可以用三蒸水,或者PBS,浓度一般为用0.1 mg/ml进行包被。
二、其他常用包被方法比较(以各种免疫分析为例):49456826.snap
三、我配成1mg/ml的储存液,用Mini-Q(超纯水)配制,放在-20℃储存,使用时稀释10倍(也用超纯水),即终浓度100ug/ml,过滤后使用。工作液过滤使用,如一次用不完,放在4℃储存。
多聚赖氨酸在水溶液中易分解,所以一次不要配太多工作液。
四、我现在要配多聚赖氨酸,书上写的用PBS配,但没写PH,浓度,向各位请教。
答:PH应该在7.0~7.4,PBS:取氯化钠7.650 g,无水磷酸氢二钠0.724 g,磷酸二氢钾0.210g溶于蒸馏水1000 mL中,以1N氢氧化钠溶液调pH值为7.0~7.4,经121℃灭菌15分钟
必须确定每个细胞系和应用的最佳条件。
在5 mg聚赖氨酸中加入50 mL无菌组织培养水。
在培养表面进行无菌涂覆(1.0 mL/25 cm2)(仅允许此种处理)。轻轻晃动以确保涂层均匀。
5分钟后,将表面的溶液吸去,并使用无菌组织培养水彻底冲洗。
在加入细胞或培养基之前至少干燥2小时。
*注意:步骤1对于聚赖氨酸溶液(P4707和P4832)并非必需。